pPICZ B

pPICZ A，B和C是3.3 kb的毕赤酵母蛋白载体。表达的重组蛋白是融合蛋白，含有一个C-端多肽，多太重含c-myc和C-His标签。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白，并且可以用在任何毕赤酵母中，包括X33，GS115菌株，SMD1168H，KM71H。 pPICZ系列载体包含以下元素： ?5'片段含有AOX1启动子的严格调控，利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因（Ellis等，1985; Koutz等人，1989;tschopp等人，1987A）。 ?Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选（Baron等人,1992; Drocourt等人，1990）。 ?C-端含Myc和His标签，可以用于检测和纯化重组蛋白。 ?pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。

0001 AGATCTAACA TCCAAAGACG AAAGGTTGAA TGAAACCTTT TTGCCATCCG ACATCCACAG 
0061 GTCCATTCTC ACACATAAGT GCCAAACGCA ACAGGAGGGG ATACACTAGC AGCAGACCGT 
0121 TGCAAACGCA GGACCTCCAC TCCTCTTCTC CTCAACACCC ACTTTTGCCA TCGAAAAACC 
0181 AGCCCAGTTA TTGGGCTTGA TTGGAGCTCG CTCATTCCAA TTCCTTCTAT TAGGCTACTA 
0241 ACACCATGAC TTTATTAGCC TGTCTATCCT GGCCCCCCTG GCGAGGTTCA TGTTTGTTTA 
0301 TTTCCGAATG CAACAAGCTC CGCATTACAC CCGAACATCA CTCCAGATGA GGGCTTTCTG 
0361 AGTGTGGGGT CAAATAGTTT CATGTTCCCC AAATGGCCCA AAACTGACAG TTTAAACGCT 
0421 GTCTTGGAAC CTAATATGAC AAAAGCGTGA TCTCATCCAA GATGAACTAA GTTTGGTTCG 
0481 TTGAAATGCT AACGGCCAGT TGGTCAAAAA GAAACTTCCA AAAGTCGGCA TACCGTTTGT 
0541 CTTGTTTGGT ATTGATTGAC GAATGCTCAA AAATAATCTC ATTAATGCTT AGCGCAGTCT 
0601 CTCTATCGCT TCTGAACCCC GGTGCACCTG TGCCGAAACG CAAATGGGGA AACACCCGCT 
0661 TTTTGGATGA TTATGCATTG TCTCCACATT GTATGCTTCC AAGATTCTGG TGGGAATACT 
0721 GCTGATAGCC TAACGTTCAT GATCAAAATT TAACTGTTCT AACCCCTACT TGACAGCAAT 
0781 ATATAAACAG AAGGAAGCTG CCCTGTCTTA AACCTTTTTT TTTATCATCA TTATTAGCTT 
0841 ACTTTCATAA TTGCGACTGG TTCCAATTGA CAAGCTTTTG ATTTTAACGA CTTTTAACGA 
0901 CAACTTGAGA AGATCAAAAA ACAACTAATT ATTCGAAACG AGGAATTCAC GTGGCCCAGC 
0961 CGGCCGTCTC GGATCGGTAC CTCGAGCCGC GGCGGCCGCC AGCTTTCTAG AACAAAAACT 
1021 CATCTCAGAA GAGGATCTGA ATAGCGCCGT CGACCATCAT CATCATCATC ATTGAGTTTG 
1081 TAGCCTTAGA CATGACTGTT CCTCAGTTCA AGTTGGGCAC TTACGAGAAG ACCGGTCTTG 
1141 CTAGATTCTA ATCAAGAGGA TGTCAGAATG CCATTTGCCT GAGAGATGCA GGCTTCATTT 
1201 TTGATACTTT TTTATTTGTA ACCTATATAG TATAGGATTT TTTTTGTCAT TTTGTTTCTT 
1261 CTCGTACGAG CTTGCTCCTG ATCAGCCTAT CTCGCAGCTG ATGAATATCT TGTGGTAGGG 
1321 GTTTGGGAAA ATCATTCGAG TTTGATGTTT TTCTTGGTAT TTCCCACTCC TCTTCAGAGT 
1381 ACAGAAGATT AAGTGAGACC TTCGTTTGTG CGGATCCCCC ACACACCATA GCTTCAAAAT 
1441 GTTTCTACTC CTTTTTTACT CTTCCAGATT TTCTCGGACT CCGCGCATCG CCGTACCACT 
1501 TCAAAACACC CAAGCACAGC ATACTAAATT TTCCCTCTTT CTTCCTCTAG GGTGTCGTTA 
1561 ATTACCCGTA CTAAAGGTTT GGAAAAGAAA AAAGAGACCG CCTCGTTTCT TTTTCTTCGT 
1621 CGAAAAAGGC AATAAAAATT TTTATCACGT TTCTTTTTCT TGAAATTTTT TTTTTTAGTT 
1681 TTTTTCTCTT TCAGTGACCT CCATTGATAT TTAAGTTAAT AAACGGTCTT CAATTTCTCA 
1741 AGTTTCAGTT TCATTTTTCT TGTTCTATTA CAACTTTTTT TACTTCTTGT TCATTAGAAA 
1801 GAAAGCATAG CAATCTAATC TAAGGGGCGG TGTTGACAAT TAATCATCGG CATAGTATAT 
1861 CGGCATAGTA TAATACGACA AGGTGAGGAA CTAAACCATG GCCAAGTTGA CCAGTGCCGT 
1921 TCCGGTGCTC ACCGCGCGCG ACGTCGCCGG AGCGGTCGAG TTCTGGACCG ACCGGCTCGG 
1981 GTTCTCCCGG GACTTCGTGG AGGACGACTT CGCCGGTGTG GTCCGGGACG ACGTGACCCT 
2041 GTTCATCAGC GCGGTCCAGG ACCAGGTGGT GCCGGACAAC ACCCTGGCCT GGGTGTGGGT 
2101 GCGCGGCCTG GACGAGCTGT ACGCCGAGTG GTCGGAGGTC GTGTCCACGA ACTTCCGGGA 
2161 CGCCTCCGGG CCGGCCATGA CCGAGATCGG CGAGCAGCCG TGGGGGCGGG AGTTCGCCCT 
2221 GCGCGACCCG GCCGGCAACT GCGTGCACTT CGTGGCCGAG GAGCAGGACT GACACGTCCG 
2281 ACGGCGGCCC ACGGGTCCCA GGCCTCGGAG ATCCGTCCCC CTTTTCCTTT GTCGATATCA 
2341 TGTAATTAGT TATGTCACGC TTACATTCAC GCCCTCCCCC CACATCCGCT CTAACCGAAA 
2401 AGGAAGGAGT TAGACAACCT GAAGTCTAGG TCCCTATTTA TTTTTTTATA GTTATGTTAG 
2461 TATTAAGAAC GTTATTTATA TTTCAAATTT TTCTTTTTTT TCTGTACAGA CGCGTGTACG 
2521 CATGTAACAT TATACTGAAA ACCTTGCTTG AGAAGGTTTT GGGACGCTCG AAGGCTTTAA 
2581 TTTGCAAGCT GGAGACCAAC ATGTGAGCAA AAGGCCAGCA AAAGGCCAGG AACCGTAAAA 
2641 AGGCCGCGTT GCTGGCGTTT TTCCATAGGC TCCGCCCCCC TGACGAGCAT CACAAAAATC 
2701 GACGCTCAAG TCAGAGGTGG CGAAACCCGA CAGGACTATA AAGATACCAG GCGTTTCCCC 
2761 CTGGAAGCTC CCTCGTGCGC TCTCCTGTTC CGACCCTGCC GCTTACCGGA TACCTGTCCG 
2821 CCTTTCTCCC TTCGGGAAGC GTGGCGCTTT CTCAATGCTC ACGCTGTAGG TATCTCAGTT 
2881 CGGTGTAGGT CGTTCGCTCC AAGCTGGGCT GTGTGCACGA ACCCCCCGTT CAGCCCGACC 
2941 GCTGCGCCTT ATCCGGTAAC TATCGTCTTG AGTCCAACCC GGTAAGACAC GACTTATCGC 
3001 CACTGGCAGC AGCCACTGGT AACAGGATTA GCAGAGCGAG GTATGTAGGC GGTGCTACAG 
3061 AGTTCTTGAA GTGGTGGCCT AACTACGGCT ACACTAGAAG GACAGTATTT GGTATCTGCG 
3121 CTCTGCTGAA GCCAGTTACC TTCGGAAAAA GAGTTGGTAG CTCTTGATCC GGCAAACAAA 
3181 CCACCGCTGG TAGCGGTGGT TTTTTTGTTT GCAAGCAGCA GATTACGCGC AGAAAAAAAG 
3241 GATCTCAAGA AGATCCTTTG ATCTTTTCTA CGGGGTCTGA CGCTCAGTGG AACGAAAACT 
3301 CACGTTAAGG GATTTTGGTC ATGAGATC